Оптимальные условия культуры

Категория: Статьи. 17 Май 2013

Оптимальные условия культуры

Метод смешанных культур лейкоцитов (MLC), описанный выше, т. е. культивирование клеток в плоскодонных сосудах в D-MEM с добавлением небольших концентраций 2-МЭ, дает простой, всеобъемлющий, количественный способ генерирования высоких ответов цитотоксических Т-лимфоцитов in vitro. Добавление 2-МЭ может дать в результате до 20-50-кратного увеличения активности CTL на 1 культуру (при измерении на пике ответа).

Оптимальные условия культуры (кривые, зависящие от дозы, кинетика ответа, геометрия культуральных сосудов при использовании низких концентраций клеток и т. д.) должны определяться для каждой исследуемой системы отдельно. Нужные культуральные условия для генерирования активности мышиных CTL также можно создать при помощи некоторых других более сложных методов.

В результате недавних исследований появилась возможность предположить, что цитотоксические Т-лимфоциты, направленные против вирусных опухолевых антигенов, можно получить и в сингенной MLTC. При помощи вышеописанного метода в качестве стимулятора аллоиммунных лимфоцитов памяти недавно с успехом применили субклеточные аллоантигенные препараты.

Методика разделения клеток внесла большой вклад в изолирование, идентификацию и характеристику иммунных лимфоидных клеток и в особенности тех, которые вовлечены в клеточно-оиосредованпый иммунитет. Скорость седиментации при одной единице гравитации (1 g) обладает несколькими преимуществами:

а) разделяет клетки строго на основании внутренне присущих качеств, а именно, размера клеток;

б) клетки не подвергаются грубой обработке (4°С, в течение 4-5 ч);

в) при использовании данной методики можно за один раз обработать сравнительно большие количества клеток (150- 200 и клеток на 11 см камеры);

г) метод хорошо воспроизводим;

д) метод может применяться как в качестве эффективного средства очистки клеточной суспензии для получения живых ядросодержащих клеток, свободных от эритроцитов и клеточных остатков.


Полезные записи
Метод культивирования и постановка теста

Лимфоциты морской свинки

Выход гранулоцитов

Различие между цитотоксическими потенциалами разны...

Мононуклеарные клетки

Выделение лимфоцитов

Обсуждение