MLC-типирование с помощью hla-d-гомозиготных клеток

Категория: Статьи. 27 Февраль 2013

MLC-типирование с помощью hla-d-гомозиготных клеток

В основу типирования положен тот факт, что отсутствие стимулирования в MLC свидетельствует об идентичности HLA-D-детерминант клеток, а наличие ответа (стимуляция) указывает на различие данных детерминант. Пролифератив-ный ответ лимфоцитов в MLC оценивают по включению меченого тимидина в ДНК делящихся клеток. Это дает возможность судить о степени различия двух популяций клеток. В однонаправленной MLC клетки от одного донора обрабатывают митомицином-С или облучают.

Эти клетки (стимулирующие клетки) после обработки не способны к делению и к включению тимидина, но сохраняют способность вызывать трансформацию клеток, взятых от другой особи (отвечающие клетки).

Если стимулирующие клетки являются гомозиготными в отношении HLA-D-детерминант, их можно использовать для типирования HLA - D-детерминант. Как показано, клетки, подлежащие типированию, могут содержать HLA-D-детерминанты типирующей клетки в гомозиготном, гетерозиготном состояниях или не содержать их вообще. В первых двух случаях будет наблюдаться ответ, который позволит ти-пировать клетки; пролиферация будет значительно ниже, чем в том случае, когда клетки совсем лишены детерминант, по которым типируются.

Таким образом, имея панель HLA-D-гомозиготных типирующих клеток, можно получить сведения об HLA-D-детсрминантах любых особей.

источники типирующих клеток

Источником для получения типирующих клеток может служить кровь детей, рожденных в результате близкородственных браков. При браках между поколениями родственников (кровосмешение), например, между отцовской и дочерней, материнской и сыновней особью, а также между детьми одних родителей, около 25% рождающихся особей будет гомозиготными по HLA. При браке двоюродных брата и сестры возможность появления детей, гомозиготных по HLA - Осостав-ляет 6%.

В ипбредных популяциях в изолированных районах имеется большой шанс появления HLA-гомозигот-ных особей; правда, предсказать их процент очень трудно.


Полезные записи
Розетки с человеческими эритроцитами

Различные методы розеткообразования

Ингибиции иммунного связывания

Колонка из сефадекса

Мышиные лимфоциты

Тесты, выявляющие рецепторы к вирусам

Обсуждение