Метод культивирования и постановка теста

Категория: Статьи. 18 Май 2013

Метод культивирования и постановка теста

Из результатов, видно, что мнтогенный эффект ниже, если клетки были заранее заморожены. Однако это можно объяснить снижением выживаемости замороженных клеток в культуре, так как фоновые значения ответов в культуре с замороженными клетками также ниже. Аналогичное сравнение митогенного воздействия на свежевыделенные и ранее замороженные лимфоциты крови провели с Т-клетсч-ными митогенами Кон-А и ФГА.

Однако все исследованные митогены все же оказывают определенный эффект на подвергавшиеся замораживанию клетки, а это значит, что такие клетки тоже можно использовать в опытах.

Действие сыворотки на тканевую культуральную среду. Анти-Р2-микроглобулнн является сывороточным белком, обладающим митогенными свойствами. В наших экспериментах мы всегда использовали IgG-фракцию сыворотки. Нас интересовало, будут ли сохраняться митогенные свойства анти-р2ц в условиях без сыворотки. Ранее проведенные опыты показали, что активация анти-р2а клеток селезенки человека различными митогенами происходит быстрее и дает более высокие ответы в присутствии 10% сыворотки в среде тканевой культуры  кинетика ответа анти-ргр- на клетки селезенки и лимфоциты крови при добавлении 10% сыворотки и без нее.

Из результатов видно, что активация клеток селезенки немного выше в присутствии сыворотки, а на клетки периферической крови присутствие сыворотки влияет очень слабо. Эти небольшие различия возникают, возможно, из-за лучшей выживаемости клеток в среде, содержащей сыворотку, так как было обнаружено, что в исходных культурах, содержащих IX Ю5 клеток, количество клеток снизилось через 1 день до 0,9 после пребывания в сыворотке и до 0,22 - в среде, лишенной сыворотки. Через 2 дня жизнеспособность клеток снизилась до 0,53 и 0,20 соответственно.

Это количество уже не менялось в течение последующих четырех дней культивирования.

Чтобы оценить оптимальные условия для активации различными митогенами разных типов клеток, использованных в настоящей работе, мы проверяли зависимость эффекта изменения концентраций клеток в микрокультурах.


Полезные записи
Соединение HP с сефарозой

Селективные функциональные активаторы лимфоцитов ч...

Дополнительные элементы

Лимфоциты морской свинки

Выход гранулоцитов

Оптимальные условия культуры

Обсуждение