Лимфоциты различного происхождения

Категория: Статьи. 02 Май 2013

Лимфоциты различного происхождения

Взаимодействие HP с лимфоцитами можно наблюдать под флюоресцентным микроскопом при добавлении флюоресцеин- или родамин-меченого HP. Это взаимодействие можно оценить количественно по степени связывания клеток с ,25I -HP. Необработанные лимфоциты крови не связываются с HP, в то время как 70-80% обработанных нейраминидазой лимфоцитов взаимодействует с HP. НР+-клетки являются в основном Т-клетками. Опыты показывают, что количество рецепторных участков к HP на НР-связывающихся клетках равно 1 -f-2X 106 и истинная константа связывания равна 5Ч-7 8 л/мол.

Эти количества сходны с количествами, характерными для нескольких обычных лектинов, являющихся митогенными для человеческих Т-лимфоцитов. Однако HP не является митогеном для этих клеток, независимо от того, в какой форме вводится HP к лимфоцитам: в растворимой или в нерастворимой форме, в нативном состоянии (гексавалентный белок) или же в виде бивалентного фрагмента.

Молекулярные свойства HP, характер взаимодействия с лимфоцитами и отсутствие митогенности - все это дало основание для разработки метода фракционирования лнмфоцитов, представленного в данной статье. Фракционирование человеческих лимфоцитов периферической крови осуществляется на колонках, содержащих HP, связанный с гранулами сефарозы. Клетки, не имеющие рецепторов к HP, проходят через колонку, не задерживаясь, в то время как клетки, имеющие данные рецепторы, задерживаются на колонке.

Последние можно легко элюировать с колонки без нанесения ущерба их жизнеспособности при помощи D-GalNAc.

Использовались лимфоциты крови здоровых доноров, в основном относящихся к 0 и В группам крови. Идентичные результаты были получены с лимфоцитами доноров, относящихся к группе крови А. Но, так как эритроциты доноров с группой крови А взаимодействуют с HP, их кровь использовалась только в нескольких опытах. Клетки были получены из дефибринированной венозной крови при помощи желатиновой седиментации, обработки карбонилом железа и изопакфиколового центрифугирования, как было описано ранее.


Полезные записи
Истощение лимфоцитов, образующих розетки с эритроц...

Реакция на митоген

Методика высвобождения 5,Сг

Подготовка колонок с гранулами, покрытыми иммунным...

Удаление моноцитов

Агрегированные человеческие Ig

Обсуждение