Лимфоциты, образующие спонтанные розетки

Категория: Статьи. 05 Май 2013

Лимфоциты, образующие спонтанные розетки

Иммуноадсорбентом являлся человеческий IgF (гамма-глобулин Каби 16,5%, АВ Каби, Стокгольм, Швеция), соединенный с цианогенбромид-активированной сефарозой 4В. Очищенные кроличьи антитела прсципитировали %- и л-лег-кие цепи и у-тяжелую цепь, что выявлялось при анализе посредством двойной диффузии. Конъюгат имел F/P молярный уровень, равный 2,4. Бралось 5 мкг очищенных кроличьих-античеловеческих igG/0,5Xl06 клеток в 50 мл свободной от сыворотки.

Конечная концентрация конъюгата для окраски 0,5хЮ6 клеток на 50 мкл была 0,5-1 мг IgG на 1 мл. Эта концентрация антител и конъюгата, как было показано ранее, дает оптимальную степень окраски, добавление реактивов в больших концентрациях ие увеличивает фракцию окрашенных клеток . Средний процент SIg+-клеток из 8 экспериментов до обработки нейраминидазой был равен 11,6±2,6%. Процент SIg+-eTOK после обработки нейраминидазой (12 опытов) был не намного, но достоверно выше (14,7Т2,6%) (р<0,025 по Стьюденту).

Лимфоциты, образующие спонтанные розетки  с эритроцитами барана (Е), выявлялись методом Iondal et al, модифицированным lata с сотр. Розеткообразова-ние происходило в концентрированной телячьей сыворотке при инкубировании при 4° С в течение ночи. В этом и других тестах розеткообразования подсчитывали как минимум 300 клеток, при этом розеткообразующими считали только лимфоциты, связавшие как минимум 4 эритроцита. Мы заметили, что обработка лимфоцитов нейраминидазой увеличивает процент Е-розеткообразующих клеток (перед обработкой 70,2±9,3%, после обработки 80,6+4,2%; среднее ±С.

О.- стандартное отклонение по результатам 7 независимых экспериментов, Р<0,01).

Клетки, имеющие рецепторы к комплементу (ЕАС+). Лимфоциты, образующие розетки с эритроцитами барана  (Е), несущие активированный комплемент (ЕАС), выявлялись способом, описанным Perlmann с сотр. Приводим основные этапы этого теста: Е сенсибилизировали иммуноглобулином М из кроличьей антисыворотки, выработанной против стромы эритроцитов барана (ЕА), после этого производилась обработка кроличьей сывороткой с недостатком Се с целью образования ЕАС.


Полезные записи
Разделение лимфоцитов, несущих Fc-рецепторы

Иммунологическая лаборатория

Качество сравнительного значения

Гель-фильтрация смеси

Характеристика лимфоцитов

Нормальные лимфоциты крови человека

Обсуждение