Истощение В-клеток

Категория: Статьи. 27 Апрель 2013

Истощение В-клеток

Оставшиеся клетки дважды промываются с целью удаления EDTA, а затем проверяются на присутствие В- и Т-клеток с использованием специфической антисыворотки и методики флюоресцирующих антител.

Специфическое истощение Т-клеток. 50XJ06 промытых лимфоцитов инкубируются с анти-О-сывороткой или анти-MTLA-сывороткой (конечное разведение 1 :20) и адсорбированной на агаре нормальной кроличьей антисывороткой, которые используются в качестве источника комплемента (конечное разведение - 1: 12). в 1,2 мл D-MEM-5% FBS при 37 °С в течение 45 мин. Суспензии клеток лимфоцитов, инкубированные с нормальной сывороткой мышей AKR или нормальной кроличьей сывороткой и комплементом, служат в качестве контроля. Затем клетки дважды отмываются при помощи D-MEM - 5% FBS и после этого выявляются и под-считываются оставшиеся живые клетки.

Затем они проверяются на чистоту популяции при помощи иммунофлюоресцент-ных методов.

Современные достижения в развитии различных методов сделали возможным получение, выявление, изолирование и характеристику различных типов клеток, вовлеченных в клеточ-ио-опосредованный иммунный ответ на аллотрансплантаты и опухоли.

Тест высвобождения 5Сг является простым, быстрым, воспроизводимым и количественным способом характеристики клеточно-опосредованного цитолиза in vitro. Можно выявить не только CTL-эффекторные клетки, но также некоторые другие цитотоксические явления, например опосредованный макрофагами или К-клетками цитолиз. Эта методика также может быть применена при изучении фактических физических и биохимических механизмов, вовлеченных в цитолиз . Однако это зависит от наличия подходящих клеток-мишеней, .т. е. клеток, которые включают достаточное количество 51Сг и, кроме того, обладают низкими уровнями спонтанного выхода (например, <20% за 6 ч инкубации).

В некоторых системах при сравнительно высоких соотношениях лимфоцитов и клеток-мишеней, неиммунные клеточные популяции могут уменьшать или увеличивать степень спонтанного выхода, что, по-видимому, происходит благодаря защитному эффекту или, соответственно, наличию естественной клеточно-опосредо-ванной цитотокенчности.


Полезные записи
Частички железа в суспензии

Селективная активность Т и В-клеточных митогенов

Ингибиция миграции индикаторных лейкоцитов суперна...

Некоторые сферы применения HLA-D-типирования

Разделение перитонеальных клеток

Препараты клеток

Обсуждение