Ингибиция миграции индикаторных лейкоцитов супернатантами

Категория: Статьи. 28 Апрель 2013

Ингибиция миграции индикаторных лейкоцитов супернатантами

Эффект ингибиции миграции, характерный для супернатантов в культурах, содержащих антигены, необходимо проверить на лейкоцитах от доноров, не имеющих иммунитета по отношению к определенным антигенам. Супернатанты, не содержащие антигены, можно испытывать на лейкоцитах от доноров, независимо от специфического иммунного статуса донора.

Плазму крови, обогащенную лейкоцитами, готовят так, как указано выше. После приготовления ее разливают в несколько полипропиленовых пробирок, количество которых соответствует количеству бесклеточных супернатантов, которые предполагают испытывать на проявление ингибиции миграции. Индикаторные лейкоциты отмывают три раза в HBSS. После последнего центрифугирования из пробирок отсасывают весь раствор HBSS, а клетки ресуспендируют в различных культуральных супернатантах для доведения концентрации лейкоцитов до 2,1X10 на мл.

Ингибнцию миграции супернатантов культур можно проверять на очищенных полиморф-ноядерных лейкоцитах.

После инкубации суспензии при 37 С в течение Н/г ч в лунки, сделанные в агарозной среде, наслаивают по 6-8 мкл каждой суспензии клеток; через 20 ч проводят измерение зон миграции лейкоцитов описанным ранее способом. Эффект ин-гибиции миграции супернатанта из антигенстимулированпых культур выражается миграционным индексом, который указывает на соотношение между средней площадью миграции индикаторных клеток, ресуспендированных в супернатанте, взятом из антигенстимулированной культуры, и площадью миграции клеток, ресуспендированных в супернатанте, взятом из соответствующих контрольных культур.


Полезные записи
Агрегированные человеческие Ig

Частички железа в суспензии

Селективная активность Т и В-клеточных митогенов

Истощение В-клеток

Некоторые сферы применения HLA-D-типирования

Разделение перитонеальных клеток

Обсуждение