Иммуноглобулиновые колонки

Категория: Статьи. 02 Март 2013

Иммуноглобулиновые колонки

Однако другими исследователями показано, что мышиные В-клетки, имеющие высокую плотность, неактивны в том же К-клеточном тесте. Это же было показано и для человеческих лимфоцитов, так как после фракционирования на колонках, заряженных человеческими IgG и Р(аЬ)2-фрагмен-тами кроличьего античеловеческого иммуноглобулина, концентрация SIg+-oeTOK в вытекающей жидкости сильно понижена, а К-клеточная активность почти не изменяетс. Исходя из этих результатов, можно предположить, что им-муноглобулиновые (антииммуноглобулиновые) колонки снимают К-клеточную активность, задерживая лимфоциты, которые адсорбируются благодаря своим Fc-рецепторам на иммунных комплексах на бусах.

Сходным образом колонки, заряженные овальбумином и кроличьим антиовальбумином или HSA/aHTH-HSA, полностью снимают К-клеточную активность, не удаляя В-клето. Ниже приведены методы разделения лимфоцитов на этих двух типах колонок. F(ab)2-йнт и иммуноглобулиновые колонки. Так как колонки, заряженные человеческими IgG, тоже способствуют удалению лимфоцитов, имеющих Fc-рецепторы (Рс+-клетки), и поэтому уменьшают К-клеточную активность, F(ab)2-фрагменты человеческого используются в качестве субстрата для кроличьих антител на колонке.

HuF(ab)2 - продажный препарат (Gammavenin, Behringwer-ke, Marburg a. L., W. Germany). Для формирования слоя антител на колонке мы используем Р(аЬ)2-фрагменты IgG фракции кроличьей антисыворотки к HaF(ab/2). Антисыворотку приготовляли путем инъекций животным гаммавенина, освобожденного от непереваренных человеческих IgG гель-фильтрацией в сефадексе G-200.

Пепсиновые фрагменты кроличьего IgG приготовляли, как указано в ссылке 34 (переваривание происходит в течение 18 ч при 37° С в растворе ацетатного буфера, рН 4; 3 мг пепсина на 100 мг белка; проверяют на отсутствие непереваренного вещества путем гель-диффузии).


Полезные записи
Доказательство участия клеток, несущих Fc-рецептор...

Относительная частота Е+-клеток

Взаимосвязь с другими лимфоцитарными маркерами

Розетки с человеческими эритроцитами

Различные методы розеткообразования

Ингибиции иммунного связывания

Обсуждение