Характеристика лимфоцитов

Категория: Статьи. 05 Май 2013

Характеристика лимфоцитов

Подсчет белых кровяных клеток производился в мазках, окрашенных по Мей - Грюнвальд-Гимзе.98% белых клеток оказались лимфоцитами и не потеряли жизнеспособность, что было определено при окраске клеток трипановым синим. Примесь эритроцитов составила 5-10%.

HP и HP-рецепторы. Использовался хорошо очищенный гемагглютинин A Helix Pomatia, приготовленный в результате афинной хроматографии цельной крови группы А молодой овцы с добавлением Н субстанции.

Затем клетки отмывались в ТХ, содержащем 0,2% человеческого сывороточного альбумина (HSA). Как было показано раньше, эти условия являются оптимальными . Обработка лимфоцитов нейраминидазой Vibrio cholera (Behringwerke AG, Марбург, ФРГ) приводит к аналогичным результатам.

Клетки с HP-рецепторами (НР+) выявлялись методом прямой флюоресценции на живых клетках при использовании HP, связанных с тетраметилродамин-изотиоцианатом (TRITC) OD280/OD5i5=2,5. Бралось 4 мкг TRITC = HP/0,5X 10е клеток в 50 мкл, что способствует оптимальной окраске.

Окрашивание проводилось при условиях, при которых не происходит шапкообразовання (кешшнга) при 4° С в свободном от сыворотки ТХ, содержащем 0,02% NaN3, как описывалось ранее . Использовался флюоресцентный микроскоп Лейтц - Ортоплаи (проходящий свет), снабженный фильтром Bgl2, 1,5 мм, интерферентным фильтром К 510 (FITC реактивы) или КР 560 и К 610 (TRITC реактивы). В видимом и ультрафиолетовом свете под микроскопом насчитывали как минимум 200 клеток.

Клетки, чувствительные к поверхностным иммуноглобулинам (SIg+), выявлялись при помощи непрямой иммунофлюо-ресценции на живых клетках при использовании в качестве иммуноадсорбеита очищенных кроличьих античеловеческих IgG антител и IgG из бараньих, антикроличьих иммуноглобулинов, конъюгированных с флюоресцеин-изоцианатом (FITC).


Полезные записи
Качество сравнительного значения

Лимфоциты, образующие спонтанные розетки

Гель-фильтрация смеси

Нормальные лимфоциты крови человека

Истощение розеток

Истощение лимфоцитов, образующих розетки с эритроц...

Обсуждение