Удаление моноцитов

Категория: Статьи. 30 Апрель 2013

Удаление моноцитов

В обоих случаях высота смеси была не более 10 мм. Как показано, при таком способе обработки примесь моноцитов уменьшалась от 21% примерно до 1%. Процедура Б является более удобной для обработки больших объемов крови.

Перитонеальные клетки мыши брались через 4 ч и 1, 2 и 3 дня после введения мышам бактотриптона. Перед центрифугированием клетки суспендировались в 0,9% растворе l, содержащем 10% плазму, обработанную ЭДТА.

Суспензию гранулоцитов 90% чистоты (примерно 7,5х6 клеток на 1 мышь) получали в результате разделения клеток крови без изопак-фикола в течение 4 ч. В 1-й день со дна пробирки собирали чистую суспензию гранулоцитов. Из поверхностного слоя удавалось собрать обогащенную суспензию макрофагов, но при этом наблюдалось довольно заметное загрязнение этой суспензии гранулоцитами.

На 2-й и 3-й дни чистота суспензии макрофагов после центрифугирования повышалась лишь немного. Клетки, собранные после центрифугирования, на 3-й день могут использоваться без предварительного фракционирования в качестве источника макрофагов. Однако обнаружено, что в результате центрифугирования намного уменьшается загрязнение суспензии эритроцитами.

Для перитонеальных клеток процедура отмывания является более опасной (в смысле потери клеток), чем для клеток крови. Количество клеток, полученных после отмывания 0,9% раствором NaCl, широко варьировало, но во многих опытах потеря гранулоцитов и макрофагов после одного отмывания составляла 90%. Потеря клеток во время отмывания оказалась намного меньшей после добавления к промывной жидкости 10% плазмы крови, обработанной ЭДТА.

Даже добавление 2% плазмы в промывную жидкость давало положительный эффект.

В результате центрифугирования нормальных клеток костного мозга было достигнуто хорошее разделение зрелых гранулоцитов и эритроцитов. Другие сферы (применения и модификации .методики


Полезные записи
Методика высвобождения 5,Сг

Лимфоциты различного происхождения

Подготовка колонок с гранулами, покрытыми иммунным...

Агрегированные человеческие Ig

Частички железа в суспензии

Селективная активность Т и В-клеточных митогенов

Обсуждение