Тест на наличие SIg до и после обработки

Категория: Статьи. 15 Май 2013

Тест на наличие SIg до и после обработки

Тест на наличие SIg до и после обработки показал, что обработка трипсином способствует уменьшению количества SIg+ клеток на всех уровнях почти до 0. Однако при инкубировании обработанных трипсином клеток в течение 24 ч в культуральной  среде, содержащей   0,4% HSA, последующая окраска приносила иные результаты. В то время как окраска лимфоцитов, не обработанных NANA-азой, полностью восстанавливалась (10±3% до обработки трипсином, 3±2% после обработки, 8±2% после обработки трипсином и культивирования в течение 24 ч; приведены результаты 6 опытов), окраска обработанных NANA-азой   клеток восстанавливалась только на 60%  (14±3%, 1±1%, 8±2% соответственно). Исходя из этих результатов, можно предположить, что большие количества SIg, имеющиеся перед фракционированием в обработанных NANA-азой препаратах, по сравнению с не обработанными таким образом препаратами в основном представлены адсорбированными IgG, в то время как количество истинных В-клеток в обоих случаях одинаково. Во фракции I трипсинизация клеток в культуре в течение 24 ч восстанавливала количество SIg+ клеток до 60%, поэтому можно предположить, что по крайней мере половина SIg-t-клеток в этой фракции -В-клетки.   Наоборот,   после 24 ч трипсннизации фракции III количество 81д+-клеток не восстанавливалось, это позволило предположить . (но не доказать), что большинство из этих НР+-SIg+ клеток адсорбировало поверхностно IgG.

Можно также упомянуть тот факт, что культивирование лимфоцитов в течение 24 ч без трипсннизации, как описывается Labo с сотр., уменьшает процент клеток до количеств, сходных с теми, что получаются после трипсннизации в течение 24 ч в культуре. На основании этого можно также предположить, что клетки, потерявшие способность окрашиваться под влиянием этих условий, являются лимфоцитами с адсорбированными на их поверхности SIg.

Функциональная жизнеспособность лимфоцитов после фракционирования и эффективность осуществления фракционирования проверялись в опытах по 1) изучению ответной способности на мнтогены и 2) проверке антителозависимой цитотоксичности (активность К-клеток) по отношению к меченным 51Сг эритроцитам цыпленка.


Полезные записи
Выделение лимфоцитов

Количество молекул IgG на индикаторных эритроцитах...

Сыворотки крови человека

Два отмывания

Высвобождение фактора ингибиции миграции лейкоцито...

Вирус Эпштейна - Барра

Обсуждение