Сцинтилляционная жидкость

Категория: Статьи. 17 Апрель 2013

Сцинтилляционная жидкость

Лимфоциты культивировали в среде Игла MEM с буфером Хепеса и антибиотиками. Среду использовали без или с добавлением 10% инактнвированной нагреванием АВ-сывороткн человека. Культивирование осуществляли но стандартной методике в микропластинах Falcon 3040, общее количество клеток в каждой пластине на 0,2 мл составило 105-8X105. Инкубировали в течение различных периодов времени во влажной атмосфере, содержащей 5% С02 при 37°С.

За 24 ч до анализа результатов в каждую пробу добавляли по 1-2 цС\ 3Н-тнмидина (Radiochemical Centre, Amersham, England) в 0,05 мл PBS. Клетки собирали днетилнрованной водой специальным автоматическим устройством на стеклянных фильтрах, предварительно просушенных. Затем фильтры переносили в кюветы, содержащие по 5 мл сцинтилляционной жидкости, главной составной частью которой являлся толуол. Подсчет производили в сцинтилляционном счетчике Inter-technique (Nanoteknik, Stockholm, Sweden).

Средние и стандартные отклонения опытов в трех или четырех параллелях были выражены количеством импульсов в минуту.

Митогеное влияние анти-р2д, на человеческие клетки разного происхождения. Анти-р2ц добавляли в микрокультуру, содержащую 1.5Х5 клеток. Контролем служила анти-сыворотка.

Кривая зависимость-доза-ответ, характеризующая митогенное действие реагента. Контрольная сыворотка не обладала митогенным действием. Оптимальный мнтогенный эффект антн-р2ц был обнаружен в сыворотке с разведением. Регулярно наблюдался более высокий ответ со стороны клеток селезенки, чем со стороны лимфоцитов крови.

Кинетику митогенного эффекта изучали на лимфоцитах миндалин, культивированных как описано выше. Действие на свежевыделенные и замороженные клетки. Во многих случаях имеет смысл изучать клетки, подвергавшиеся замораживанию.

Поэтому в наших опытах мы проводили сравнение митогенного действия анти-р2-микроглобули-новой сыворотки в разведении  на свежевыделенные лимфоциты и на клетки, подвергавшиеся замораживанию, а затем размороженные и отмытые, как описано выше.


Полезные записи
Бусы (гранулы)

Подверженность человеческих клеток действию вируса...

Препараты эффекторных клеток

Полученные партии ЕАС 14

Поверхность градиента

Лимфоциты, которые собирают со дна пробирки

Обсуждение