Розетки с человеческими эритроцитами

Категория: Статьи. 02 Март 2013

Розетки с человеческими эритроцитами

 То небольшое количество C3d, которое они могут содержать, должно быть очень незначительно, так как известно, что человеческие CRL, содержащие только C3d-peuenTopbi, с EACl-3bmo образуют такое же количество розеток, как с EACl-3bhu (приготовленные из очищенного С и поэтому не содержащего C3d). Незрелые нейтрофилы мыши, имеющие только CSd-рецепторы, не образуют розеток с EACl-3bmo.

Очень важно проверить ЕАС 1-3d на способность образовывать розетки с человеческими эритроцитами. Так как человеческие эритроциты не имеют СЗа-рецепторов, EACl-3d-специфичность можно доказать только тогда, когда количество образующихся розеток с человеческими эритроцитами меньше 5% от того количества розеток, которые образуют EACl-ЗЬ. Эффективность ЕАС 1-3d лучше всего проверять путем розеткообразования с проверенной линией человеческих лимфобластоидных клеток в культуре. Соотношение клеток, образующих в индивидуальных клеточных линиях, остается постоянным на протяжении недель.

Лучше всего использовать ту линию, в которой все клетки образуют EACl-3d-po3eTKH, и лишь отдельные клетки, если такие есть, образуют ЕАС14-розетки. Многие линии клеток, в том числе Raj , обладают такими показателями. Если EACl-3dhl1 образуют больше 5% розеток с эритроцитами человека от того количества розеток, которое образуется при использовании EACl-ЗЬ, их необходимо вновь обработать C4b-C3b INA (или ЭДТА-мышиной сывороткой).

Если EACl-3dhu образуют слишком много розеток с человеческими эритроцитами после вторичной обработки инактиватором С4Ь-СЗЬ, то это вызвано тем, что при их приготовлении содержание С4 было слишком велико. Это можно подтвердить при проверке промежуточного продукта ЕАС10ху2 на способность к розетко-образованию с человеческими эритроцитами. С4Ь, имеющийся на ЕАС 1-3d, устойчив к действию инактиватора из-за того, что он образует комплекс с окисленным С2.

Тест розеткообразования для рецепторов к комплементу (С) 0,1 мл ЕАС, суспендированных в концентрации 0,5-1,0%, смешивают с 0,1 мл лимфоцитов или человеческих эритроцитов, суспендированных в концентрации 2- в 1 мл в силиконизированных стеклянных пробирках размером 10x75 мм или в пластмассовых пробирках таких же размеров.


Полезные записи
Относительная частота Е+-клеток

Взаимосвязь с другими лимфоцитарными маркерами

Иммуноглобулиновые колонки

Различные методы розеткообразования

Ингибиции иммунного связывания

MLC-типирование с помощью hla-d-гомозиготных клето...

Обсуждение