Реакция на митоген

Категория: Статьи. 02 Май 2013

Реакция на митоген

Средний процент (±С. О.) выхода ЕАС-связывающих клеток до и после обработки нейраминидазой в 9 независимых экспериментах был 20,3±3,2 и 21,8±3,2. Эти различия не были статистически значимыми (р>0,2). Цифры, приведенные здесь и ниже, не уточнялись путем вычитания ЕА-розеток, поскольку те составляли  1 % у не обработанных лимфоцитов.

У лимфоцитов, обработанных нейраминидазой, показатели этих контролей были немного выше (3-4%).

Включение 14С-тимидина в ДНК нефракционированных и фракционированных лимфоцитов определялось после внесения к клеткам лейкоагглютинина (La) из Phaseolus vulgaris, очищенного митогена из ФГА. Клетки культивировались 72 ч в присутствии разных доз La, как описывается во всех работах. Максимальные значения включения 14С-тимидина в необработанные и обработанные нейраминидазой лимфоциты, а также зависимые от дозы кривые, характерные для этих клеток, были одинаковыми.

Антителозависимый цитолитический потенциал лимфоцитов измерялся посредством метки эритроцитов цыпленка 51Сг. Эритроциты в данном случае выступили в качестве клеток-мишеней в присутствии максимальных разведений гипериммунной кроличьей сыворотки против эритроцитов цыпленка. В деталях этот метод описан Perlmann et al.

Для того, чтобы установить высокий уровень чувствительности, между эффекторными клетками и клетками-мишенями поддерживалось низкое соотношение (2:1 или 1:1), что дало в результате почти 20% специфического выхода 51Сг за 20 ч для нефракционированных лимфоцитов. Ипактивированная путем нагревания антисыворотка использовалась при разведении Ю-5.

Приготовление НР-сефарозного геля. HP ковалентно конъ-югировался со специально подготовленными крупными частицами сефарозы 4В, активированной цианбромидом (150- 300 мкм) или таким же образом обработанной сефарозой 6В (250-315 мкм) (Dr. Ingcmar Iohansson, Pharmacia Fine Chemicals, Uppsala, Швеция).


Полезные записи
Нормальные лимфоциты крови человека

Истощение розеток

Истощение лимфоцитов, образующих розетки с эритроц...

Методика высвобождения 5,Сг

Лимфоциты различного происхождения

Подготовка колонок с гранулами, покрытыми иммунным...

Обсуждение