Различные методы розеткообразования

Категория: Статьи. 01 Март 2013

Различные методы розеткообразования

Второй причиной является тот факт, что человеческие эритроциты крупнее бараньих и равны по размерам малым лимфоцитам. Это означает, что лимфоциты, образующие розетки с человеческими ЕАС, плохо отличаются от окружающих их человеческих эритроцитов. Наконец, необходимо заметить, что человеческие эритроциты высоко ценятся как индикаторные клетки иммуносвязывающих рецепторов для тестирования ЕАС и определения содержания в этом комплексе С4Ь или СЗЬ, и поэтому их нельзя будет использовать в этих целях, если ЕАС будут образованы человеческими эритроцитами.

Кроме различных методов розеткообразования, существует метод выявления CRL при помощи растворимых меченных радиоактивными веществами иммунных комплексов и растворимых фрагментов комплемента, меченных при помощи иммунофлюоресценции или радиоактивности. Эти методы высокоспецифичны и могут использоваться в экспериментах с двойной меткой, при которых второй тип рецепторов метят методом розеткообразования.

Из-за того что сыворотка крови содержит C4b-C3b ША ЕАС, образующиеся при добавлении всей сыворотки к ЕА, содержат варьирующее количество С4Ь, СЗЬ и C3d и поэтому являются неспецифичными для обоих типов С-рецепторов. Если использовать очищенные компоненты комплемента или С-реагенты, можно получить ЕАСНЬ или ЕАС14Ь23Ь (ЕАС1-ЗЬ), не содержащие C3d. ЕАСНЬ специфичны по отношению к иммуносвязывающим рецепторам, в то время как ЕАС1-ЗЬ взаимодействуют с обеими типами рецепторов.

EACl-ЗЬ, однако, не так прочно связываются с C3d-peuenTopaMH, как ЕАС 1-3d, которые являются специфичными по отношению к CSd-рецепторам.

рН охлажденной во льду свежей сыворотки человека, дово-дят I N НС1 до рН 7,0 и разводят в отношении 1 :3 холодной дистиллированной водой. После 30-минутного перемешивания при 0-4°С осадок (чистый С1) собирают центрифугированием в течение 30 мин при 1000 g 4°С. Супернатант удаляют, осадок промывают, осторожно ресуспендируя в охлажденном на льду 5-кратном вероналовом буфере разбавленном водой в отношении 1 : 15.


Полезные записи
Взаимосвязь с другими лимфоцитарными маркерами

Иммуноглобулиновые колонки

Розетки с человеческими эритроцитами

Ингибиции иммунного связывания

MLC-типирование с помощью hla-d-гомозиготных клето...

Колонка из сефадекса

Обсуждение